二恶英检测标准品的选择、储存及使用注意事项

二恶英（PCDD/Fs及DL-PCBs）是一类高毒性、持久性有机污染物，其检测结果的准确性直接依赖于标准品的质量。标准品作为“量值溯源的基准”，其选择、储存与使用环节的每一步失误，都可能导致检测结果偏离真实值。本文结合二恶英检测的实际需求，详细梳理标准品的选择原则、储存要点及使用中的关键注意事项，为实验室规范操作提供参考。

二恶英检测标准品的选择原则

二恶英检测的核心是准确定量，而标准品的纯度直接决定结果可靠性。PCDD/Fs与DL-PCBs标准品的纯度需≥98%（高要求检测需≥99%），需通过高效液相色谱（HPLC）或气相色谱-质谱联用（GC-MS）验证——若纯度不足，杂质峰会干扰目标化合物的积分，导致定量偏高。例如，某PCDD标准品纯度为95%，检测时杂质峰的面积可能占总峰面积的5%，直接导致结果虚高。

同源性是选择标准品的关键。同位素标记标准品（如13C标记的PCDD/Fs）是首选，其与目标化合物物理化学性质一致，但质谱响应不同，可抵消前处理损失（如萃取、净化时的吸附）与基质效应（如样品中脂类对目标物的抑制）。例如，检测土壤中2,3,7,8-TCDD时，13C标记的内标能精准校正回收率，使定量误差从±15%降至±5%以内。

认证资质是标准品有效性的保障。需选择NIST（美国国家标准与技术研究院）、IRMM（欧盟参考物质研究所）等权威机构的认证标准品，其证书包含浓度值、不确定度、有效期等信息，确保溯源性。无认证的“自制标准品”可能存在浓度偏差，曾有实验室因使用无证书的PCDD标准品，导致检测结果被监管部门驳回。

此外，需匹配检测方法的兼容性。例如，GC-HRMS（气相色谱-高分辨质谱）检测要求标准品溶剂为正己烷或甲苯（与非极性色谱柱兼容），若标准品溶剂是二氯甲烷，需先进行溶剂置换——否则溶剂峰会掩盖目标峰，影响分离效果。

标准品的规格与形式选择

标准品分固体型与溶液型。固体型（如纯品粉末）稳定性好，适合长期储存，但需自行溶解——称量10mg PCDD纯品时，若天平精度不足（如0.1mg），会导致溶解后浓度误差达±10%。溶液型（如预溶在正己烷中的PCDD/Fs溶液）更便捷，但需注意溶剂挥发性：正戊烷溶剂的溶液型标准品，3个月内浓度可能升高5%，因此需选甲苯等低挥发性溶剂的产品。

浓度规格需覆盖样品预期范围。校准曲线需用梯度浓度（如0.1pg/mL、1pg/mL、10pg/mL、100pg/mL），避免外推误差。例如，饮用水中二恶英浓度通常为pg/L级，校准曲线最低浓度需低至0.01pg/mL；焚烧飞灰中二恶英浓度达ng/g级，最高浓度需至1000pg/mL。

组分完整性也需考虑。PCDD/Fs检测需包含17种2,3,7,8-取代同系物的混合标准品，若缺少某几种（如OCDF），会导致部分目标物无法定量，影响结果全面性。DL-PCBs检测则需包含12种指示性PCBs的标准品，确保覆盖所有调控目标。

批量检测时，可选择高浓度储备液（如100ng/mL），分小份（0.5mL/份）储存，避免反复冻融。稀释时需用校准过的移液器（如10μL、100μL），逐级稀释（如从100ng/mL到10ng/mL再到1ng/mL），减少一步稀释的误差。

标准品的温度储存策略

二恶英对温度敏感，高温会加速降解（如醚键断裂、脱氯），需-20℃以下冷冻储存。13C标记的PCDD/Fs溶液在-20℃下可稳定1年，4℃下仅稳定3个月；固体型PCDD纯品需-80℃储存，防止吸潮降解。储存前需检查包装密封性——若安培瓶有裂纹，溶剂挥发会导致浓度升高。

反复冻融会破坏标准品稳定性。溶液型标准品需分小份，每次用1份，避免从-20℃拿取后再放回。例如，某储备液分10份，每次用1份，可避免5次冻融导致的浓度下降10%。

解冻需缓慢进行。从-20℃取出的标准品，应先放4℃冰箱过夜，或用铝箔包裹在室温下放置1-2小时——直接室温快速解冻会导致溶剂挥发，浓度升高。解冻后需摇匀，确保溶液均匀。

储存温度需稳定。冷冻柜需定期检查温度（用温度记录仪），避免停电或故障导致温度超过-15℃。曾有实验室因冷冻柜故障，标准品在10℃下放置3天，导致浓度下降20%，需重新购买标准品。

包装与避光的细节要求

二恶英对紫外线敏感，易光解，需用避光包装。棕色玻璃安培瓶或螺口瓶是首选，透明玻璃或塑料瓶会导致光解——13C标记的2,3,7,8-TCDD溶液在透明瓶中储存1个月，浓度下降10%，而棕色瓶中仅下降2%。

包装材质需选玻璃。塑料容器（如聚乙烯瓶）会吸附二恶英，导致浓度降低。螺口瓶需用PTFE（聚四氟乙烯）衬垫的盖子，避免橡胶衬垫吸附目标物——某实验室曾用橡胶盖的螺口瓶储存标准品，3个月后浓度下降15%，原因是橡胶吸附了PCDD。

包装需直立放置。溶液型标准品若倒置，溶液会接触瓶盖，导致污染或吸附。装溶液时需留1-2cm空间，避免倾斜时溢出。

标签需清晰持久。标签应包含名称、浓度、批号、有效期、储存条件，用防水防油标签纸或记号笔写在玻璃上——曾有实验室因标签模糊，将10pg/μL的标准品误当1pg/μL使用，导致结果偏高10倍。

储存环境的污染防控

储存区域需与其他有机试剂隔离。二恶英易吸附，若与农药（如DDT）、多环芳烃（PAHs）混放，挥发性有机物会污染标准品。例如，某实验室将PCDD标准品与DDT放在同一柜子，检测时DDT峰占总峰面积的3%，导致结果无效。

环境需干燥。潮湿会导致包装生锈或滋生霉菌，影响纯度。可在储存柜中放硅胶干燥剂，每3个月更换一次，保持相对湿度≤60%。

储存区域需定期清洁。每月用乙醇擦拭冷冻柜内壁与隔板，去除表面污染物。清洁后通风晾干，再放标准品——若清洁后残留乙醇，会与标准品溶剂混合，影响浓度。

易挥发的溶液型标准品需放密封干燥器中。例如，正己烷溶液的标准品放在带硅胶的干燥器中，可防止溶剂挥发，保持浓度稳定。

使用前的准备与验证

使用前需检查外观。溶液型标准品若浑浊、沉淀或变色（如无色变黄色），说明已降解，不能用；固体型标准品若结块或变色（如白色变灰色），需丢弃。曾有实验室用浑浊的PCDD溶液做校准曲线，导致曲线R²仅0.98，结果被质疑。

浓度验证是必做步骤。用GC-MS或HPLC测定浓度，与证书对比——若证书浓度为100pg/μL，测定结果为98pg/μL（误差±2%），符合要求；若为90pg/μL（误差±10%），需更换标准品。

固体型标准品称量需精准。用分析天平（精度0.01mg），在干燥器中操作，避免吸潮。例如，称量5mg PCDD纯品，若天平误差0.02mg，会导致浓度误差±0.4%，需多次称量取平均值。

需检查有效期。超过有效期的标准品即使外观正常，也可能降解。例如，某标准品有效期至2024年12月，2025年1月使用时，浓度虽在误差范围内，但稳定性无法保证，不能用于正式检测。

使用中的污染控制技巧

操作需在超净工作台或通风橱中进行。工作台需用乙醇或丙酮擦拭，打开风机30分钟，过滤空气中的颗粒物。曾有实验室在普通实验台处理标准品，导致空气中的灰尘污染，检测时出现未知峰。

工具需专用。移液器、针头、移液管等仅用于二恶英标准品，不得接触其他样品或试剂。例如，用移过农药的移液器移取标准品，会导致农药污染，使结果中出现农药峰。工具使用后用正己烷冲洗3次，晾干后再用。

避免交叉污染。处理标准品时，不要同时处理样品——若处理高浓度焚烧飞灰样品后未清洁工作台，再处理标准品，会导致标准品被污染，浓度升高。

操作时需戴无粉丁腈手套与防有机蒸气口罩。手套避免粉末吸附二恶英，口罩防止吸入溶剂蒸气。操作中不要触摸面部或其他物品，避免污染。

稀释与校准曲线的准确制备

稀释需用校准过的移液器。例如，用10μL移液器移取标准品到10mL容量瓶，用正己烷定容，稀释1000倍——移液器需每6个月校准一次，确保体积误差≤±1%。

逐级稀释减少误差。从100pg/μL稀释到1pg/μL，需先稀释到10pg/μL（取100μL到10mL），再稀释到1pg/μL（取1mL到10mL）——一步稀释（取10μL到10mL）的误差可能达±5%，而逐级稀释仅±1%。

校准曲线需包含空白对照。空白用相同溶剂制备，扣除仪器背景信号。例如，校准曲线点包括空白、0.1pg/mL、1pg/mL、10pg/mL、100pg/mL，每个点做3次重复，取平均值计算。

相关性系数需≥0.995。若R²<0.995，可能是稀释误差或标准品浓度不准确，需重新检查。例如，某实验室校准曲线R²=0.98，原因是移液器未校准，移取体积误差达±3%，校准后R²升至0.998。