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医学检验中尿液有形成分分析的标准化操作与结果判读标准

三方检测机构-王工 2023-12-26

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尿液有形成分分析医学检验中反映泌尿系统及全身疾病的重要手段,其结果的可靠性直接依赖标准化操作与规范判读。从标本采集到报告签发的全流程标准化,既是保证检验质量的核心,也是临床医师准确解读病情的基础。本文围绕尿液有形成分分析的关键环节,详细阐述标准化操作要点与结果判读标准,为检验人员提供可落地的实践指南。

标本采集与预处理的标准化要求

标本质量是尿液有形成分分析的第一步,需严格遵循采集规范。首选晨尿(清晨第一次尿),因其浓缩度高、有形成分稳定,能更准确反映病理状态;随机尿适用于急诊,但需避免剧烈运动、大量饮水后采集,以免稀释标本。采集容器需使用清洁、干燥、无防腐剂的一次性尿杯,避免使用含消毒剂或洗涤剂的容器,防止破坏有形成分。

采集量需保证10-15ml,过少会导致离心后沉渣量不足,影响镜检结果;过多则可能增加标本稀释风险。标本采集后需在2小时内送检,若无法及时检测,应冷藏(2-8℃)保存,但冷藏时间不超过4小时;如需长期保存,可添加少量防腐剂(如甲醛,但需注意甲醛对细胞形态的影响,需在报告中注明)。

特殊标本如导尿或膀胱穿刺尿,需在采集时严格无菌操作,避免细菌污染;小儿或尿失禁患者的标本,需使用清洁尿袋收集,但需尽快转移至尿杯,防止尿液与尿袋材质发生反应。预处理时需充分混匀标本(轻轻颠倒8-10次),避免有形成分沉淀,确保检测的代表性。

尿沉渣分析仪的标准化操作要点

目前临床常用的尿沉渣分析仪多基于流式细胞术或成像技术,其操作需严格遵循厂家说明书与实验室SOP。首先是仪器校准,需使用厂家提供的标准颗粒(如红细胞、白细胞标准品)定期校准(每月1次),校准项目包括细胞计数的准确性、形态识别的特异性,确保仪器性能稳定。

检测前需检查仪器状态,包括试剂(鞘液、染色液)的有效期与液面高度,避免因试剂不足导致检测失败;标本需经300目滤网过滤,去除黏液丝、纤维等大颗粒杂质,防止堵塞仪器流路。检测参数设置需统一,如稀释倍数(通常为1:10)、流速(根据仪器型号调整,一般为10-20μl/min),避免因参数差异导致结果偏差。

仪器检测时需注意标本的温度,最佳检测温度为18-25℃,过低会导致细胞皱缩,过高可能使细胞溶解;检测后需及时清洗仪器流路,使用专用清洗液去除残留的标本与试剂,防止交叉污染。对于仪器报警的结果(如“红细胞形态异常”“管型增多”),需立即进行手工镜检确认,不可直接报告仪器结果。

手工镜检的标准化操作流程

手工镜检是尿液有形成分分析的“金标准”,用于验证仪器结果或检测仪器无法识别的有形成分(如蜡样管型、特殊结晶)。离心操作需标准化:取10ml混匀尿液于离心管,以1500rpm离心5分钟,弃去上清液,保留0.2ml沉渣(约管底1cm),避免过度离心导致细胞破碎或沉渣丢失。

镜检前需将沉渣充分混匀(用吸管轻轻吹打5次),取1滴沉渣置于载玻片上,加盖盖玻片(避免气泡),使用普通光学显微镜观察。观察顺序为:先低倍镜(10×10)扫视全片,寻找管型、结晶等大颗粒有形成分,计数10个低倍镜视野(LPF)的管型数;再换高倍镜(10×40),观察细胞形态,计数20个高倍镜视野(HPF)的红细胞、白细胞数。

染色技术可提高有形成分的识别率:如苏丹III染色用于鉴别脂肪球(呈橘红色),结晶紫-亚甲蓝染色(瑞氏染色)用于区分细菌与黏液丝(细菌染成紫色,黏液丝呈淡蓝色),过碘酸-Schiff染色用于识别肾小管上皮细胞(胞浆呈红色)。染色时需控制染色时间(如苏丹III染色10分钟)与染色液浓度,避免染色过深或过浅影响判断。

常见尿液有形成分的判读标准

红细胞:正常形态为双凹圆盘状,直径约7μm,无核;异常形态包括皱缩红细胞(因标本浓缩或高渗导致,呈锯齿状)、环形红细胞(胞浆内血红蛋白丢失,呈环状)、影形红细胞(血红蛋白完全丢失,仅存细胞膜)。参考范围为0-3个/HPF,超过则提示血尿,需结合形态判断来源(如均一性红细胞多为非肾小球性血尿,异形红细胞多为肾小球性血尿)。

白细胞:以中性粒细胞为主,直径约10μm,胞浆内有细小颗粒,核分2-5叶;脓细胞为变性的白细胞,胞浆浑浊、颗粒粗大,核结构不清,常见于泌尿系统感染。参考范围为0-5个/HPF,增多提示感染或炎症。

管型:由肾小管分泌的Tamm-Horsfall蛋白凝聚而成,需在低倍镜下观察。透明管型为无色透明,呈圆柱状,两端钝圆,参考范围0-1个/LPF;颗粒管型内含粗细不等的颗粒,提示肾小管损伤;细胞管型含肾小管上皮细胞或白细胞,如上皮细胞管型提示肾小管坏死,白细胞管型提示肾盂肾炎;蜡样管型呈蜡黄色、质地较厚,提示肾小管严重变性坏死。

结晶:草酸钙结晶为无色、折光性强的八面体或哑铃形,常见于高钙尿或草酸代谢异常;尿酸结晶为黄色、针状或菱形,常见于痛风或高尿酸血症;磷酸铵镁结晶为无色、信封状或菱形,常见于尿路感染(变形杆菌所致);胆红素结晶为橘红色、针状或颗粒状,提示肝细胞性黄疸或胆道梗阻。结晶判读需结合临床信息,排除生理性结晶(如饮食因素导致的草酸钙结晶)。

异常结果的确认与复核流程

当仪器或手工镜检发现异常结果(如红细胞>5个/HPF、管型>1个/LPF),需首先排查标本误差。如红细胞增多需确认标本是否被月经血、痔疮血污染,可通过询问患者月经史、观察标本颜色(污染血呈鲜红色,真性血尿呈洗肉水样)判断;白细胞增多需排除标本放置过久导致的白细胞溶解,可通过观察白细胞形态(溶解的白细胞胞浆模糊、核结构不清)鉴别。

若标本无误差,需进行形态学复核:红细胞异常形态需计数异形红细胞比例(>80%提示肾小球性血尿,<20%提示非肾小球性血尿);管型异常需确认管型类型,如颗粒管型需区分细颗粒与粗颗粒(粗颗粒管型提示更严重的肾小管损伤);结晶异常需结合尿液pH值(如尿酸结晶易在酸性尿中出现,磷酸铵镁结晶易在碱性尿中出现)。

复核后需结合临床信息,如患者是否有尿频、尿急、尿痛(提示尿路感染),是否有水肿、蛋白尿(提示肾小球疾病),是否有关节痛(提示痛风),避免单纯依赖检验结果作出判断。若结果与临床不符,需重新采集标本复查,确保结果的可靠性。

尿液有形成分分析的质量控制策略

室内质控需每日进行,使用定值尿沉渣质控品(含红细胞、白细胞、管型等有形成分),按照日常检测流程操作,记录结果并绘制质控图(如Levey-Jennings图)。若结果超出质控范围(如±3SD),需查找原因:仪器故障(如流路堵塞)、试剂问题(如染色液过期)、操作误差(如离心时间不足),解决后重新检测,直至质控结果在控。

室间质评需定期参加(每年2-3次),使用临检中心发放的质评标本,按照要求检测并回报结果。对比质评结果与靶值的差异,若差异超过可接受范围(如红细胞计数差异<15%),需分析原因:如镜检技能不足导致的形态误判,或仪器校准不及时导致的计数误差,针对性改进操作。

人员培训是质量控制的关键,检验人员需定期参加镜检技能培训(每季度1次),通过读片考核(如识别异常红细胞、罕见管型)提高判读准确性;新入职人员需进行3个月的镜检带教,考核合格后方可独立操作。此外,实验室需定期更新SOP,结合最新的行业标准(如CLSI的尿液分析指南)调整操作流程。

结果报告的标准化规范

结果报告需使用国际通用术语,避免使用方言或非标准术语(如“红血球”改为“红细胞”,“脓球”改为“脓细胞”)。单位需统一:红细胞、白细胞用“个/HPF”,管型用“个/LPF”,结晶用“+/HPF”或“++/HPF”表示数量。参考范围需根据实验室自身情况制定(如晨尿参考范围:红细胞0-3个/HPF,白细胞0-5个/HPF),或采用行业标准参考范围。

报告内容需包括标本信息(姓名、性别、年龄、标本类型、采集时间)、检测方法(如“尿沉渣分析仪+手工镜检”)、有形成分结果(如红细胞3个/HPF,白细胞2个/HPF,透明管型0个/LPF)、异常结果标注(如红细胞5个/HPF标注“↑”,并在备注中说明“镜检见异形红细胞占60%”)。

报告签发前需由资深检验人员复核,核对标本信息与检测结果的一致性,确认异常结果已完成复核流程,避免错发或漏发报告。报告需及时发送至临床(通常2小时内),并保留原始数据(如仪器检测图谱、手工镜检记录)至少2年,便于后续追溯与质量改进。

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