透皮吸收测试中皮肤样本的选择标准是什么样的

透皮吸收测试是评估外用制剂有效性与安全性的核心环节，皮肤样本的选择直接决定结果的准确性——不同物种、部位、生理状态的皮肤在屏障功能、结构上差异显著，若选择不当，可能导致结果偏离真实生理情况，影响产品研发或监管决策。因此，明确皮肤样本的选择标准是透皮测试设计的核心前提。

物种选择：匹配测试目的与外推需求

人类皮肤是透皮测试的“金标准”，其角质层结构、表皮厚度最接近人体真实状态，但来源有限（主要来自尸体捐赠或手术剩余组织），临床前研究常需用动物替代。猪皮肤因表皮厚度（0.1-0.2mm）、角质层细胞层数（15-20层）与人类背部相似度超80%，是最常用的替代模型，适合药物透皮速率初步筛选；小鼠皮肤角质层仅10-20μm厚，屏障功能弱，透皮速率比人类高3-5倍，用于快速评估药物“可透性”；兔皮肤真皮层厚，常用于刺激性测试，但透皮速率与人类差异大（约为人类的2-4倍），少用于定量研究。

当需预测人体临床效果时，应尽量用人类皮肤——例如某慢性疼痛透皮贴片在猪皮肤筛选后，需用尸体腹部皮肤验证透皮速率，确保结果接近人体场景。人类皮肤使用需符合伦理：尸体皮肤需获家属授权，手术剩余皮肤需经患者知情同意，且需通过病原体检测（如HIV、乙肝），避免生物安全风险。

解剖部位：遵循“部位特异性”原则

同一物种不同部位的皮肤，因角质层厚度、皮脂腺分布的差异，透皮特性不同。人类手掌角质层厚0.8-1.2mm，透皮速率仅为前臂的1/3-1/5；面部皮脂腺密度（500-1000个/cm²）是背部的2-3倍，脂溶性药物（如维生素A酯）吸收速率比背部高2-4倍；腹部皮肤松弛、毛发少，是透皮贴片常用部位，透皮速率与背部接近但比大腿内侧慢15%。

测试需选与目标应用部位一致的皮肤：开发面部保湿霜应选脸颊皮肤（避免鼻翼等皮脂腺活跃区）；开发前臂贴剂需用前臂屈侧皮肤；足部护理膏需用足底皮肤（剔除老茧）。动物皮肤同理——猪背部皮肤模拟人类背部贴片测试，猪腹部皮肤评估贴剂粘贴力对透皮的影响。需避免“用单一部位代替所有场景”：若用手掌皮肤测试面部护肤品，会因角质层过厚低估透皮速率，错过优化机会。

生理状态：排除异常条件的干扰

皮肤生理状态直接影响吸收：婴儿皮肤角质层仅10-15层，屏障未成熟，透皮速率比成人高2-3倍；老年皮肤表皮萎缩（厚度减20%-30%）、角质层含水量低15%-20%，脂溶性药物吸收速率降10%-20%。测试婴儿护肤品需用婴儿皮肤，测试老年透皮药物需用老年皮肤。

性别差异也需考虑：女性面部皮肤角质层比男性薄10%-15%，皮脂腺分泌低20%-30%，水溶性药物吸收速率高约25%，开发女性专用护肤品需选女性面部皮肤。健康状态是底线——湿疹、银屑病或创伤皮肤的TEWL值（经表皮失水率）是正常的5-10倍，透皮速率高3-5倍，需直接剔除。例如某湿疹软膏若误用湿疹皮肤测试，会误以为药物吸收过多，错误降低处方浓度。

完整性与新鲜度：保证屏障功能真实

角质层是透皮主要屏障，样本需保持完整——划痕、破损会导致屏障丧失。验证方法有二：TEWL测试（正常人类皮肤10-20g/(m²·h)，超过30g/(m²·h)则剔除）；荧光素钠渗透试验（1小时后真皮层出现荧光说明角质层破损）。

新鲜度影响皮肤特性：4℃冷藏24小时，角质层含水量降10%，透皮速率增20%；48小时后含水量降至60%-70%，透皮速率增30%。冷冻保存（-20℃）需用10%甘油PBS浸泡，避免反复冻融（超2次会破坏细胞间脂质，屏障降50%）。样本需尽快使用：人类皮肤24小时内、猪皮肤12小时内完成测试。某实验室曾用冷藏48小时的猪皮肤测试中药贴剂，导致透皮速率高估35%，需重新优化处方。

细胞活性：匹配代谢功能需求

若测试需评估药物在皮肤内的代谢（如前体药物活化），需选保留活性的样本——新鲜皮肤（采集后6小时内）或3D重建皮肤模型（如EpiDerm™），它们保留表皮细胞的代谢酶（如酯酶）。例如某维A酸凝胶测试中，需用新鲜人类表皮评估维A酸降解速率（由酯酶介导），冷冻1个月的皮肤酯酶活性降40%，会低估代谢速率。

若仅关注被动透皮（如物理渗透），可用γ射线照射（25-30Gy）灭活的猪皮肤——既保持角质层完整，又消除代谢影响，适合评估药物“纯渗透能力”。需注意：甲醛固定会使角质层蛋白变性，增加透皮速率，不建议使用。

伦理与合规：确保来源合法可追溯

皮肤样本需遵守伦理与监管要求：人类尸体皮肤需来自合法组织库（如红十字会），提供伦理审批文件；手术剩余皮肤需经患者知情同意，不得用于商业盈利。动物皮肤需经机构伦理委员会批准，采用人道处死方式（如二氧化碳窒息），避免不必要使用。

来源需可追溯：人类皮肤需记录捐赠者年龄、性别、死亡时间、死因（排除皮肤疾病）及病原体检测报告；动物皮肤需记录品种（如Yorkshire猪）、年龄（6-8周龄）、饲养环境（SPF级）及处死时间。这些记录需保存5年以上，以备FDA、EMA核查——某实验室因未保留人类皮肤来源记录，曾被要求重新测试，延误产品申报。