染发类化妆品毒理测试的重点检测项目和标准

染发类化妆品作为直接接触头皮、皮肤甚至黏膜的特殊化妆品，其配方中的着色剂（如对苯二胺）、氧化剂（如过氧化氢）、碱化剂（如氨水）等成分，若存在安全隐患，可能引发皮肤刺激、过敏或长期健康风险。毒理测试是保障其安全性的核心环节，而明确重点检测项目及对应的标准，是确保结果科学合规的关键。本文结合染发产品的使用场景与成分特性，解析毒理测试的核心项目及国内外权威标准要求。

急性经口毒性测试：评估单次摄入的安全边界

急性经口毒性测试针对“消费者误吞”的极端场景——尽管染发产品非食品，但儿童或操作不当的成年人可能接触口腔。国内《化妆品安全技术规范》（2015版）要求，染发类产品需通过急性经口毒性试验；国际常用OECD 401指南（一次剂量法）。

测试用健康小鼠或大鼠，按梯度剂量灌胃后观察14天：记录死亡、体重变化、行为异常等指标，以“半数致死量（LD50）”判定毒性。染发产品需满足LD50＞5000mg/kg（体重），即“实际无毒”——例如某款含植物提取物的染发剂，LD50＞10000mg/kg，说明单次误吞风险极低。

需注意，氨水等成分的刺激性气味可能降低动物摄食量，因此需用强制灌胃法保证剂量准确，避免结果偏差。

急性皮肤刺激性/腐蚀性测试：判断即时接触伤害

染发产品需在头皮停留20-40分钟，皮肤刺激性是最直接的风险。国内标准为GB/T 21604-2008（急性皮肤刺激试验），国际对应OECD 404指南。

传统方法用兔背部去毛皮肤：涂抹受试物24小时后，观察红斑、水肿，按“原发性刺激指数（PII）”评分——PII＜0.5为无刺激，0.5-2.0为轻度刺激，＞4.0为重度刺激。若结果为中度及以上，需调整配方（如降低过氧化氢浓度）。

体外替代模型（如EPISKIN人工皮肤）已成为主流：将受试物作用于三维皮肤模型，通过MTT法检测细胞活力——活力＞50%为无刺激，结果与动物试验一致性达80%以上。例如某款高浓度过氧化氢染发剂，若体外模型活力＜40%，需降低氧化剂含量。

皮肤变态反应测试：预防慢性免疫过敏

皮肤致敏性是染发产品最常见的安全问题（约30%过敏案例由对苯二胺引发）。国内标准为GB/T 16886.10-2017（致敏试验），国际常用OECD 406（豚鼠最大化试验）或OECD 442A（局部淋巴结试验，LLNA）。

豚鼠试验分“诱导期”（皮内注射+涂皮）和“激发期”（再次涂皮），观察激发后24-48小时的皮肤反应——致敏率＞10%判定为致敏原。LLNA法则通过检测小鼠局部淋巴结的淋巴细胞增殖率（刺激指数SI＞3为致敏），更符合“3R原则”（减少动物使用）。

例如某含对苯二胺的染发剂，若LLNA结果SI=4.5，需在包装标注“含对苯二胺，过敏体质者慎用”；若致敏率＞20%，则需禁用该成分。

经皮吸收测试：揭示成分渗透风险

染发成分需穿透毛发鳞片着色，但部分成分（如对苯二胺）可能透过头皮进入血液循环。经皮吸收测试量化渗透量，国内标准为GB/T 27819-2011（体外经皮吸收试验），国际对应OECD 428。

测试用离体皮肤（人尸皮或猪皮）固定于扩散池：donor侧涂受试物，receiver侧定期采集液体，用HPLC检测成分浓度，计算“渗透系数（Kp）”——Kp＜1×10^-6 cm/h为低渗透，＞1×10^-4 cm/h为高渗透。

例如某款染发剂的对苯二胺Kp=3×10^-7 cm/h，说明渗透量极低，不会进入体内循环；若Kp＞5×10^-5 cm/h，则需降低该成分浓度（我国规定对苯二胺最大允许浓度为6%）。

致突变性测试：排查遗传毒性

部分芳香胺类着色剂可能干扰DNA结构，引发基因突变。致突变性测试是排查此类风险的关键，国内标准为GB 15193.4-2014（AMES试验），国际对应OECD 471（沙门氏菌突变试验）。

AMES试验用突变型沙门氏菌（TA98、TA100）：将受试物与细菌共培养，观察回变菌落数——回变率＞2倍空白组且呈剂量依赖性，判定为致突变阳性。例如某含邻苯二胺的染发剂，若回变率为3.2倍，需禁用该成分。

染色体畸变试验（OECD 473）是补充：用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）观察染色体断裂、易位，进一步确认遗传毒性——若畸变率＞5%，需终止该成分使用。

眼部刺激性测试：防范意外接触伤害

染发时飞溅的液体可能进入眼睛，引发角膜损伤。国内标准为GB/T 21609-2008（急性眼部刺激试验），国际对应OECD 405。

传统兔眼试验：将受试物滴入结膜囊，观察1-72小时的角膜浑浊、虹膜充血、结膜水肿，按“Draize评分”计算总得分——0分为无刺激，＞25分为重度刺激。若结果为重度刺激，需加注“避免接触眼睛”警示语，并调整配方（如增加缓冲剂降低pH）。

体外替代方法（如EpiOcular人工眼角膜）已被OECD认可：通过检测模型细胞活力判断刺激性——活力＞70%为无刺激，结果与兔眼试验一致性达90%以上。例如某款染发剂用EpiOcular测试，活力＞85%，无需再做动物试验。

体外替代测试：符合伦理的现代评估方式

随着“3R原则”（减少、替代、优化）推广，体外测试成为染发产品毒理评估的趋势。例如用EPISKIN测皮肤刺激性（检测LDH释放量）、EpiOcular测眼部刺激（MTS法）、LLNA替代豚鼠致敏试验（淋巴细胞增殖率），这些方法更贴近人体、标准化且可重复。

国内已发布GB/T 35790-2018（体外皮肤刺激）等标准，部分方法纳入《化妆品安全技术规范》补充试验。例如某企业用EPISKIN测试新款染发剂，3天内得出“无刺激”结果，比动物试验节省10天，成本降低约50%。

体外测试不仅符合伦理，还能快速响应产品迭代需求——例如某品牌调整氧化剂浓度后，用体外模型重新测试，2天内确认安全性，加速产品上市进程。