室内空气中甲醛污染检测的分光光度法操作步骤

分光光度法是室内空气中甲醛污染检测的经典技术，基于甲醛与乙酰丙酮试剂的特征显色反应（生成黄色化合物），通过测定吸光度实现定量分析，因操作简便、成本可控、结果稳定被各类检测机构广泛采用。规范的操作步骤是保证检测准确性的核心——从采样到数据处理的每一个细节，都可能影响最终结果的可靠性。本文围绕分光光度法的全流程，拆解具体操作要点，为检测人员提供可落地的执行指南。

检测前的准备工作

检测前需完成仪器、试剂与环境的核查：仪器包括可见分光光度计（波长范围360-800nm，需定期校准波长精度）、大气采样器（流量误差≤5%，用皂膜流量计验证）、10ml具塞比色管（需校准容积）、50ml/100ml容量瓶、气泡吸收管（需检查气密性）；试剂需提前准备乙酰丙酮显色剂、甲醛标准溶液（10μg/ml）、乙酸铵、冰乙酸等，所有试剂均需为分析纯。

环境条件需满足：实验室温度20-25℃、相对湿度≤75%，避免阳光直射或通风过强导致试剂变质；采样前需关闭被测空间门窗12小时，确保室内空气处于稳定状态，避免外界气流干扰甲醛浓度。

空气样品的采集方法

采样点设置需遵循“代表性”原则：住宅、办公室等小空间按对角线或梅花点布置3-5个点，每个点距离墙面≥0.5米、距地面1.2-1.5米（与人呼吸带高度一致），避开空调出风口、门窗、家具边缘等气流扰动区域；大型空间（如商场）需按面积划分区域，每50㎡增设1个点。

采样操作：将大气采样器与装有5ml吸收液（蒸馏水或去离子水）的气泡吸收管连接，设置流量为0.5-1L/min，采样时间20-40分钟（确保采样体积10-40L，浓度高则缩短时间）。采样时，进气口需朝上，避免吸入地面灰尘；采样结束后，立即用橡皮塞密封吸收管管口，标注采样点编号、时间、流量，置于4℃冷藏箱中保存，24小时内完成分析（超过时间会因甲醛挥发导致结果偏低）。

关键试剂的配制与保存

乙酰丙酮显色剂是反应核心，配制方法：称取25g乙酸铵溶于100ml蒸馏水，加入3ml冰乙酸、0.25ml乙酰丙酮，搅拌至完全溶解，定容至250ml容量瓶。该溶液需用棕色玻璃瓶存储，室温下有效期6个月，若出现浑浊或颜色变深需重新配制。

甲醛标准储备液需标定：取2.8ml甲醛溶液（37-40%）溶于1L蒸馏水，摇匀后用碘量法标定（加碘标准液、氢氧化钠溶液，再用硫代硫酸钠滴定），计算浓度后稀释为10μg/ml的标准使用液，置于4℃冰箱保存，有效期1个月。

校准曲线的绘制流程

取7支10ml具塞比色管，分别加入0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml甲醛标准使用液（对应浓度0、1、2、4、6、8、10μg/ml），用蒸馏水补至5ml。向每支管中加1ml乙酰丙酮显色剂，摇匀后放入沸水浴（保持沸腾状态）加热10分钟，取出后立即用冷水冷却至室温。

以空白溶液（0ml标准液）为参比，在分光光度计413nm波长下测定各管吸光度。以甲醛浓度（μg/ml）为横坐标、吸光度为纵坐标绘制校准曲线，计算回归方程y=ax+b（a为斜率，b为截距），要求相关系数r≥0.999（若r<0.999，需检查试剂配制或加热时间是否一致）。

样品溶液的显色反应操作

取采样后的吸收液5ml（若吸收液不足5ml，用蒸馏水补至5ml）倒入10ml比色管，加入1ml乙酰丙酮显色剂，摇匀后与校准曲线用的比色管同步放入沸水浴加热10分钟——需确保所有比色管的加热时间、水浴温度一致，避免因反应程度不同导致吸光度偏差。

加热结束后，立即转移至冷水中冷却5分钟（保持管塞关闭，防止甲醛挥发）。若样品溶液颜色过深（吸光度超过校准曲线最大值），需取1ml样品液稀释至5ml（稀释倍数记为n），重新加显色剂进行反应，确保吸光度落在曲线线性范围内。

分光光度计的调试与测定

打开分光光度计电源，预热30分钟至仪器稳定，设置波长为413nm（乙酰丙酮-甲醛反应产物的最大吸收波长）。将空白溶液倒入1cm石英比色皿（需用蒸馏水冲洗3次，倒扣晾干），放入样品室，调节“0”旋钮使吸光度显示0.000；取出空白皿，用滤纸擦净待测样品皿外壁的水渍或指纹（避免影响光透过率）。

将显色后的样品溶液倒入比色皿，放入样品室，关闭舱门读取吸光度值，记录数据。每测定5个样品后，需重新测定空白溶液的吸光度（若偏差超过0.005，需检查仪器稳定性或比色皿清洁度）。

结果的计算与数据处理

甲醛浓度计算公式为：C = [(A - A0) × B × V1 × n] / (V0 × Vt)，其中：C为室内甲醛浓度（mg/m³）；A为样品吸光度；A0为空白吸光度；B为校准曲线斜率的倒数（即1/a，单位μg/吸光度）；V1为样品溶液总体积（5ml）；n为稀释倍数（未稀释则为1）；V0为采样体积（L，=采样流量×采样时间）；Vt为显色时取的样品体积（5ml）。

数据处理需注意：每个采样点计算1次浓度，取所有点的平均值作为最终结果；若某点浓度与平均值偏差超过20%，需核查该点采样是否违规（如靠近通风口），必要时重新采样；所有数据保留三位有效数字，记录需包含采样时间、地点、仪器型号、试剂批次等信息，确保数据可追溯。