化妆品毒理测试包含哪些主要检测项目和指标

化妆品直接作用于人体皮肤、黏膜等部位，其安全性直接关系消费者健康。为规范安全评价，中国《化妆品安全技术规范》（2015版）等法规明确，毒理测试需围绕“接触风险、反应类型、影响维度”构建核心体系——从单次接触的急性毒性，到长期使用的亚慢性影响，从局部皮肤反应到全身遗传损伤，均需通过具体项目与指标量化评估。本文将系统拆解化妆品毒理测试的主要项目及关键指标，解析其在安全评估中的实际意义。

急性毒性试验：评估单次接触的安全边界

急性毒性试验模拟人体单次或短期接触化妆品的极端场景（如误吞面霜、吸入喷雾），根据接触途径分为经口、经皮、吸入三类。试验动物通常选用健康小鼠或家兔，周期1-14天。

核心指标是“半数致死量（LD50）”——即能导致50%试验动物死亡的剂量，数值越大毒性越低。例如，经口LD50＞5000mg/kg体重时，原料被归为“实际无毒”；经皮LD50＞2000mg/kg体重则为“低毒”。

除LD50外，还需观察动物中毒症状（如呕吐、抽搐）、体重变化及死亡时间。若动物出现持续体重下降、呼吸困难，提示毒性可能作用于呼吸系统或消化系统，为后续风险控制提供方向。

皮肤刺激性/腐蚀性试验：判断皮肤直接接触的反应

皮肤是化妆品最常接触的部位，刺激性（可逆炎症）与腐蚀性（不可逆损伤）是核心风险。试验用“家兔皮肤斑贴法”：将样品涂于背部脱毛区，敷贴24小时后去除，观察1-4天的皮肤反应。

评价采用“Draize评分”：红斑（0-4分，无到严重红斑）、水肿（0-4分，无到严重水肿）的总分决定等级——≤0.5分为“无刺激性”，0.5-2.0分为“轻度刺激性”，＞2.0分为“强刺激性”；若出现溃疡、坏死则为“腐蚀性”。

人体斑贴试验是补充：选择健康志愿者，将样品贴于前臂内侧48-72小时，观察红斑、瘙痒等反应。敏感皮肤人群的反应更显著，因此试验会纳入不同肤质志愿者，确保结果贴近实际。

眼刺激性/腐蚀性试验：评估眼部接触的风险

眼部黏膜脆弱，睫毛膏、眼线液等误入耳内可能致严重损伤。传统用“家兔眼刺激试验”：滴0.1ml样品入眼，闭合1分钟后观察1-7天的角膜、虹膜、结膜反应。

指标包括角膜混浊（0-4分，透明到完全混浊）、虹膜损伤（0-2分，正常到萎缩）、结膜充血/水肿（0-4分，无到严重充血）。总分≤1.0分为“无刺激性”，＞4.0分或角膜溃疡为“腐蚀性”。

体外替代方法渐普及，如“EpiOcular角膜模型”（人角膜上皮细胞培养），通过细胞活力（MTT法）判断：活力＞75%为无刺激性，＜50%为强刺激性，与家兔试验相关性达80%以上，符合动物福利要求。

皮肤致敏试验：检测潜在的过敏反应

皮肤致敏是免疫介导的延迟反应，分“诱导期”（首次接触激活免疫）和“激发期”（再次接触出现症状）。常用“局部淋巴结试验（LLNA）”：给小鼠涂样品，注射放射性同位素标记的胸腺嘧啶，7天后测淋巴结增殖指数（SI）——SI≥3为阳性。

“豚鼠最大化试验（GMPT）”是另一种方法：先注射样品+佐剂诱导，2周后再涂样品激发，观察红斑、水肿评分——≥1分为阳性。需注意，低剂量可能诱导过敏，高剂量反而抑制免疫，因此需做剂量梯度试验。

致敏反应的特点是“首次接触无反应，再次接触才发作”，因此试验需模拟“诱导-激发”两阶段，确保不遗漏潜在致敏原。

光毒性与光致敏试验：关注紫外线协同作用

部分成分（如防晒剂、香料）在紫外线（UV）下会产生额外毒性：光毒性是直接光化学反应（接触后数小时出现红斑、水疱），光致敏是免疫介导（24-48小时后出现瘙痒、丘疹）。

光毒性试验用“小鼠耳肿胀法”：涂样品后照射UVB，24小时后测耳厚度——增加率＞25%为阳性。光致敏试验用“LLNA+UVA照射”：测淋巴结增殖指数，SI≥3为阳性。

需区分两者：光毒性与UV剂量正相关，停止接触后反应消失；光致敏即使低剂量UV也能触发，且反应更持久。因此，防晒类、喷雾类产品需重点做此试验。

亚慢性毒性试验：评估重复接触的累积影响

化妆品需长期使用，亚慢性试验模拟“重复接触”——经口90天（如漱口水）、经皮28天（如日霜）、吸入28天（如香水）。试验动物用大鼠或家兔，周期覆盖“累积毒性”的发生时间。

核心指标包括：（1）一般状况：体重（每周测，下降提示代谢异常）、进食量（减少提示胃肠道刺激）；（2）血液学：白细胞（升高提示炎症）、红细胞（降低提示贫血）；（3）生化学：ALT/AST（肝损伤）、肌酐（肾损伤）；（4）组织病理：肝、肾、皮肤的病理变化（如肝细胞坏死）。

例如，某保湿霜经皮28天试验中，动物ALT升高2倍且肝脏脂肪变性，提示可能存在“累积性肝毒性”，需限制成分用量。

遗传毒性试验：检测基因损伤风险

遗传毒性是致癌、致畸的前提，需覆盖“基因突变、染色体损伤、DNA损伤”三个层面。常用组合试验：（1）Ames试验（检测基因突变）：用突变型沙门氏菌，若样品使突变菌回复野生型（能合成组氨酸）则阳性；（2）染色体畸变试验（检测结构异常）：用CHO细胞，观察染色体断裂率，＞5%为阳性；（3）微核试验（检测分离异常）：用小鼠骨髓细胞，微核率＞千分之五为阳性。

单一试验可能漏检，因此需组合——如Ames+染色体畸变+微核试验。例如，某染发剂Ames试验阳性，进一步做染色体畸变试验确认，若均阳性则判定“具有遗传毒性”，禁止用于化妆品。

生殖毒性试验：评估对生殖系统的影响

部分成分（如邻苯二甲酸酯）可能干扰内分泌，影响生殖功能。试验分“胚胎-胎仔发育毒性”（检测对胚胎的影响）和“围产期毒性”（检测对母体及幼仔的影响）。

胚胎-胎仔试验：给孕鼠涂样品至分娩前，观察着床数（受精卵植入子宫的数量）、胎仔存活率（出生时存活比例）、畸形率（外观如唇裂，内脏如心脏缺损，骨骼如肋骨缺失）。

围产期试验：从孕鼠分娩前1周到幼仔断奶（21天）涂样品，观察幼仔生长（体重、睁眼时间）、行为（运动、学习能力）及存活率。若幼仔体重增长慢、断奶存活率＜80%，提示可能影响母体乳汁或幼仔发育。